原发性肝癌不仅发病率明显较高，还会严重威胁健康甚至安全，临床中主要采用手术、分子靶向、免疫治疗、放射治疗方式实施治疗^[1]，且近年来放射治疗方式成为临床中首选的治疗方式，由于技术与经验均获得显著提升，使得原有的姑息性放疗方式被转变成为根治性放疗方式，能够为患者带来效果更佳的治疗体验^[2]。然而诸多患者对于根治性放疗方式存在较大的不耐受情况，因此为确保患者能够顺利接受治疗，并获得良好的治疗效果，需要选择适宜的指标进行观察，通过实践发现，以往选用的血清甲胎蛋白（AFP）指标，未具有较高的灵敏度与特异度^[3]，为此医生开始评估患者的血浆游离核酸（cfDNA）指标^[4]。    

1.资料与方法

1.1一般资料

为保证研究所需用的50例接受放射治疗的中晚期原发性肝癌病例能够被快速有效的择取，需要将病例入院的起始与终止时间截点分别定在2023年7月与2024年10月，（29:21）、（55.2±0.3）岁分别为病例的性别、年龄的具体分布情况。

1.2纳入标准：①经病理诊断均存在原发性肝癌，且所有患者的病情进展均已至中晚期；②均无需在家属辅助的情况下完成研究。

1.3排除标准：①患者的病历资料缺失；②对于放射治疗存在较大的不耐受情况。

1.4方法

（1）放疗方式。在放疗治疗的全程均使患者保持仰卧的体位姿势，为避免患者发生体位移动的不良情况，需要使用真空垫予以良好的固定，并且还需要采取有效的使患者保持平静。将螺旋CT扫描仪作为主要的检查设备，在对仪器的层距进行设定的过程中，5mm是规定的设定值，将膈顶上3cm作为上半身的扫描临界范围，将右肾下极作为下半身的扫描临界范围，使用仪器对该部位实施扫描检查，之后利用TPS治疗计划系统对所获图像输入予以有效的设计。选择定位CT与MRI图像融合技术，在对窗宽进行确定时，400是规定的设定值，将40作为定位CT的窗位设定值，在明确各设定值后需要勾画出大体肿瘤体积（GTV）与周边危及器官（OAR），之后仔细观察解剖结构，据此调整勾画范围。放射治疗处方剂量：若患者的肿瘤直径不足5cm，则将处方剂量设定在48-60Gy/8-10f，每周对患者实施3次放射治疗；若患者的肿瘤直径超过5cm，则将处方剂量设定在40-54Gy/10-15f，在确定每周的治疗次数时，确定为5次。若患者的肿瘤直径不足5cm，则选用立体定向体部放疗（SBRT）进行治疗，若患者的肿瘤直径超过5cm，则选用调强放疗（IMRT）进行治疗。

（2）实验室检测。在接受放疗治疗的不同阶段分别抽取其一定量的静脉血，在抗凝情况下严格按照离心步骤对静脉血实施离心处理，提取上层血浆，然后吸取600μL，将其盛入1.5ml的离心管中，使用PBS进行稀释，然后在4^oC的环境下实施严格的离心处理，提取上层清液，选择Quanti DNA Direct cfDNA检测试剂盒并结合仪器使用步骤对清液中的血浆cfDNA浓度进行检测。除此之外，还需要运用相关设备与方式对血清AFP、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）水平进行准确检测。

（3）影像学检查。使用增强MRI扫描检查分别于放疗前及放疗40Gy时对患者实施扫描检查，在对螺距进行确定时，5mm是规定的设定值。

1.5观察指标

①放疗不同时间段血浆cfDNA、血清AFP、肿瘤直径变化情况。

②放疗不同时间段ALT、AST水平变化情况。

1.6统计学处理

导入SPSS 22.0软件进行统计学分析，计量资料以(±s)的形式表示，计数资料以率（%）的形式表示，分别使用t与x²方式进行检验，检验水准α=0.05。

2.结果

2.1原发性肝癌患者放疗不同时间段血浆cfDNA、血清AFP、肿瘤直径变化比较

首先确定基线血浆cfDNA浓度，之后分别使用放疗后48h的血浆cfDNA浓度、放疗40Gy时的血浆cfDNA浓度及放疗结束时的血浆cfDNA浓度与基线血浆cfDNA浓度进行对比，结果显示，前者的比值超过1，而后两者的比值均未超过1。首先确定基线血清AFP浓度，之后分别使用放疗后48h的血清AFP浓度、放疗40Gy时的血清AFP浓度及放疗结束时的血清AFP浓度与基线血清AFP浓度进行比较，结果显示，三者的比值均未超过1。首先确定基线的肿瘤直径值，之后使用放疗40Gy时肿瘤直径同基线肿瘤直径值进行比对，结果显示，比值未超过1。具体见表1。

表 1 原发性肝癌患者放疗不同时间段血浆cfDNA、血清AFP、肿瘤直径变化比较

注：与基线值1比较，#P<0.05

2.2原发性肝癌患者放疗不同时间段ALT、AST水平变化比较

首先确定基线血清ALT与基线血清AST浓度，之后分别使用放疗后48h的血清ALT浓度与血清AST浓度、放疗40Gy时的血清ALT浓度与血清AST浓度及放疗结束时的血清ALT浓度与血清AST浓度与基线血清ALT及基线血清AST浓度进行比对，结果显示，三者的比值均与1相接近，具体见表2。

表 2 原发性肝癌患者放疗不同时间段ALT、AST水平变化比较

3.讨论

对于原发性肝癌患者而言，血浆cfDNA能够间接反映细胞损伤的程度^[5-6]。然而因外周血中的ctDNA含量显著较少，无法进行足够量的提取，且即便能够提取，也无法在较短时间内完成检测，需要花费较高的检测成本，因而无法获得广泛地应用范围^[7]。依据临床研究发现，血浆cfDNA含量与ctDNA表现为正相关^[8]。对于正常人员而言，其cfDNA浓度较低，而对于患有恶性肿瘤疾病的患者而言，其cfDNA浓度会显著提升，此时对cfDNA浓度进行检测，便能够对肿瘤细胞死亡数量、机体损伤程度情况进行间接反映^[9-11]。

依据相关学者的研究结果可知，对cfDNA浓度进行准确的检测，对监测肝细胞癌患者的疗效存在较高的临床价值，通过结果发现，与机体内cfDNA未具有较高表达水平的患者相比较而言，存在高水平表达患者无法获得较高的5年生存率，且无发获得较长的进展生存期（PFS）。依据相关学者的研究发现，通过比对血清与血浆中的cfDNA浓度，后者的浓度水平明显较低，且不会产生较大的浓度变化范围，因而血浆cfDNA被视为更佳的cfDNA的检测样品。

依据本研究结果可知，在对原发性肝癌患者实施放疗治疗后的短期内，其血浆cfDNA浓度表现为一过性升高情况，由此说明肿瘤细胞对放疗存在较高的敏感性，当肿瘤细胞坏死后，其会从细胞内释出，随着放射治疗处方剂量的不断增加，大量的肿瘤细胞被杀伤甚至被杀灭，因而会在较大程度上降低体内肿瘤负荷，随之而来的便是血浆cfDNA浓度持续下降，利用MRI对患者实施复查后可知，患者的肿瘤病灶的直径也出现持续性地减小情况。与基线血清AFP值相比，放疗后不同时间点的比值均表现出下降的特点，通过联合检测血清AFP与cfDNA，可对肝癌的放疗效果进行有效的预测。而通过其他结果显示，不论是放疗前还是放疗后，血清ALT、AST水平均未出现明显的改变，说明放疗治疗不会损伤患者的肝脏。

综上所述，本研究认为血浆cfDNA指标均较高的评估价值。

参考文献：

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[2]叶婷丹,雷学忠.早期肝癌无创诊断之匙——循环游离DNA联合型液体活检[J].临床肝胆病杂志,2022,38(4):923-926. 

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[5]李月翠,胡伟跃,李成行,等.5-羟甲基胞嘧啶修饰在HBV相关肝癌中的表达及意义[J].哈尔滨医科大学学报,2023,57(3):264-270.

[6]王瑨,柳俨哲,陈况,等.血浆循环核酸应用于肝细胞癌诊断与预后评价的初步探索[J].解放军医学院学报,2021,42(1):10-16.

[7]胡玉莲,齐健,王姝洁,等.基于H4C6甲基化水平和cfDNA浓度构建多癌种癌症风险预测模型[J].安徽医科大学学报,2023,58(4):597-603.

[8]徐娟,辛杰晶,李毅,等.cfDNA检测联合肝脏MRI在肝细胞癌筛查中的应用价值[J].循证医学,2022,22(4):212-216. 

[9]徐剑媛,邱源旺.循环游离DNA在早期肝细胞癌筛查中的研究进展[J].中西医结合肝病杂志,2024,34(6):569-572. 

[10]夏娜梅,赵言腾,杨乾坤,等.血浆cfDNA甲基化联合检测在肝癌诊断中的价值[J].河南医学研究,2024,33(11):1921-1925. 

[11]陈延华,邓凯文.ctDNA对肝细胞肝癌患者根治性肝切除术后短期复发的预测价值[J].实用医药杂志,2021,38(6):504-507,封3.